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来源不明、鉴别困难、药敏难做的真菌感染究竟可怕在哪?

2021-09-24 12:30:57来源:检验医学网
引起侵袭性真菌感染的主要病原微生物为:念珠菌、曲霉菌、隐球菌等。临床常见的抗真菌药物包括:多烯类的两性霉素B、三唑类的氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、艾沙康唑,氟胞嘧啶类的5-氟胞嘧啶,棘白菌素类的卡泊芬净、米卡芬净、阿尼芬净。

抗真菌药物的作用机制主要包括:作用于细胞膜的多烯类-插入含麦角固醇的细胞膜,形成通道,造成K+外排;唑类-阻断麦角固醇合成;作用于DNA/RNA的5-氟胞嘧啶;作用于细胞壁的棘白菌素类-阻断葡聚糖合成。

随着2019年耳念珠菌在全球的爆发,美国已将该菌株列为紧急威胁的名单,虽然中国暂无爆发趋势,但是中国专家提示仍需警惕院感。此外抗菌药物使用频次的增加等因素导致真菌耐药形式日趋严峻,因此真菌药敏试验检测的开展显得尤其重要。

2018年国家卫健委发文“关于持续做好抗菌药物临床应用管理相关工作的通知”,强调了加强临床微生物实验室的建设和人才培养;2019年《临床微生物实验室真菌检测能力建设基本要求》的发布,这一系列的操作都预示着临床微生物对提高真菌检测能力的强烈需求。

目前,国际上公认的真菌药敏相关的指导标准文件以CLSI发布的M60、M61、M59、M57、M27、M44、M38、M51为主,见表1,其中最新更新的版本为M59,M60,M61见表2。

表1 CLSI真菌药敏指导文件

表2 2020年更新文件清单

真菌药敏试验方法主要包括:微量肉汤稀释法、浓度梯度法、纸片扩散法,此外包括商品化的微稀释方法。其中商品化的产品代表主要有梅里埃的ATB Fungus真菌药敏试剂,赛默飞的Sensititre YeastOne真菌药敏板,安图生物的真菌药敏检测试剂盒(比色/比浊法)。

目前国内普遍认可的真菌药敏参考标准来源于CLSI,其中M27文件主要描述的是酵母样真菌稀释法药物敏感试验的参考方法,该文件适用范围为念珠菌属、隐球菌属。其中微稀释方法的结果判读在24h,对于隐球菌结果判读在72h,且目前的折点都是在24h结果阅读的基础上制定的。结果判读标准见表3。此外M60文件描述了酵母菌稀释法药物敏感试验标准,对于MIC法和纸片法质控范围及临床折点进行了相应的展示。以上是关于念珠菌属和隐球菌属的主要涉及的药敏标准文件。

关于丝状真菌的文件主要为:M38(丝状真菌稀释法药物敏感试验的参考方法)和M61(丝状真菌药物敏感试验标准)。其中最新版的2020年M61文件,新增了伏立康唑对于烟曲霉的折点。同样重要的还有M59文件,主要描述抗真菌药物敏感性试验流行病学介值。

表3 念珠菌属和隐球菌属微稀释结果判读